page_banner

Cell Direct RT qPCR Kit—SYBR GREEN I

Kitbeskrivning:

◮Enkelt och effektivt: med Cell Direct RT-teknologi kan RNA-prov erhållas på bara 7 minuter.

Provbehovet är litet, så lite som 10 celler kan testas.

◮Hög genomströmning: den kan snabbt detektera RNA i celler odlade i 384, 96, 24, 12, 6-brunnars plattor.

DNA Eraser kan snabbt ta bort frigjorda genom, avsevärt minska effekten på efterföljande experimentella resultat.

Optimerat RT- och qPCR-system gör tvåstegs RT-PCR omvänd transkription mer effektiv och PCR mer specifik och mer resistent mot RT-qPCR-reaktionshämmare.

foregene strength


Produktdetalj

Produkttaggar

FAQ

Beskrivningar

Detta kit använder ett unikt lyseringsbuffertsystem som snabbt kan frigöra RNA från odlade cellprover för RT-qPCR-reaktioner, vilket eliminerar den tidskrävande och mödosamma RNA-reningen.RNA-mallen kan erhållas på bara 7 minuter.Den 5×Direct RT Mix och 2×Direkta qPCR Mix-SYBR-reagenser som tillhandahålls av kitet kan snabbt och effektivt få kvantitativa PCR-resultat i realtid.

5×Direct RT Mix och 2×Direct qPCR Mix-SYBR har stark inhibitortolerans, och lysatet av proverna kan användas som mall för RT-qPCR direkt.Detta kit innehåller det unika RNA högaffinitet Foregene omvänt transkriptas och Hot D-Taq DNA-polymeras, dNTPs, MgCl2, reaktionsbuffert, PCR-optimeringsmedel och stabilisator.

Specifikationer

200×20μl Rxns, 1000×20μl Rxns

Kit komponenter

Del I

Buffert CL

Foregene Protease Plus II

Buffert ST

Del II

DNA Eraser

5× Direct RT Mix

2× Direct qPCR Mix-SYBR

50× ROX referensfärg

RNase-fri ddH2O

Instruktioner

Egenskaper & fördelar

Enkelt och effektivt: med Cell Direct RT-teknologi kan RNA-prov erhållas på bara 7 minuter.

■ Provbehovet är litet, så lite som 10 celler kan testas.

■ Hög genomströmning: den kan snabbt detektera RNA i celler odlade i 384, 96, 24, 12, 6-brunnars plattor.

■ DNA Eraser kan snabbt ta bort frigjorda genom, avsevärt minska påverkan på efterföljande experimentella resultat.

■ Optimerat RT- och qPCR-system gör tvåstegs RT-PCR omvänd transkription mer effektiv och PCR mer specifik och mer resistent mot RT-qPCR-reaktionshämmare.

Kitapplikation

Användningsområde: odlade celler.

- RNA frisatt genom provlys: endast tillämpligt på RT-qPCR-mallen i detta kit.

- Satsen kan användas för följande ändamål: genuttrycksanalys, verifiering av siRNA-medierad gentystnadseffekt, läkemedelsscreening, etc.

Diagram

Cell Direct RT qPCR diagram

Lagring och hållbarhet

Del I av detta kit bör förvaras vid 4 ℃;Del II bör förvaras vid -20 ℃.

 Foregene Protease Plus II bör förvaras vid 4℃, frys inte vid -20 ℃.

 Reagens 2×Direct qPCR Mix-SYBR bör förvaras vid -20i mörkret;om den används ofta kan den också förvaras vid 4℃ för korttidsförvaring (använd inom 10 dagar).


  • Tidigare:
  • Nästa:

  • Realtids PCR-primerdesignprinciper

    Forward Primer och Reverse Primer

    För realtids-PCR är primerdesign mycket viktigt.Primers är relaterade till specificiteten och effektiviteten av PCR-amplifiering och kan utformas med hänvisning till följande principer:

    Primerlängd: 18-30bp.

    GC-halt: 40-60%.

    Tm-värde: Primerdesignprogramvara, såsom Primer 5, kan ge primerns Tm-värde.Tm-värdena för uppströms- och nedströmsprimrarna bör vara så nära som möjligt.Tm-beräkningsformeln kan också användas: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).När PCR utförs väljs i allmänhet en temperatur under primerns Tm-värde på 5 °C som glödgningstemperatur (motsvarande ökning av glödgningstemperaturen kan öka specificiteten för PCR-reaktionen).

    Primers och PCR-produkter:

    Design primer PCR-amplifieringsproduktens längd är företrädesvis 100-150 bp.

    Designprimers i mallens sekundära strukturella område bör undvikas så mycket som möjligt.

    Undvik bildandet av 2 eller flera komplementära baser mellan 3′-ändarna av uppströms och nedströms primers.

    Primer 3′ terminalbas kan inte finnas med 3 ytterligare på varandra följande G eller C.

    Själva primrarna kan inte ha komplementära strukturer, annars kommer en hårnålsstruktur att bildas, vilket påverkar PCR-amplifieringen.

    ATCG bör fördelas så jämnt som möjligt i primersekvensen, och den 3′-terminala basen bör undvikas som T.

    Bilaga 1:Cell Direct RT-qPCR Kit komponenttilläggspaket

    1.Celllyslösning


    Celllyslösning

    Kit komponenter

    (24-brunnars lyssystem / brunn)

    DRT-01011-A1

    DRT-01011-A2

    100 T

    500 T

    Deljag

    Buffert CL

    20 ml

    100 ml

    Foregene Protease Plus II

    400 μl

    1 ml × 2

    Buffert ST

    1 ml × 2

    10 ml

    DelII

    DNA Eraser

    400 μl

    1 ml × 2

    2.RT Mix


    RT Mix

    Kit komponenter

    (20 μl reaktionssystem)

    DRT-01011-B1

    200 T

    5× Direct RT Mix

    800 μl

    RNase-fri ddH2O

    1,7 ml × 2

     

    3.qPCR-blandning


    qPCR-blandning

    Kit komponenter

    (20 μl reaktionssystem)

    DRT-01011-C1

    DRT-01011-C2

    200 T

    1000 T

    2× Direct qPCR Mix-SYBR

    1 ml × 2

    1,7 ml × 6

    50× ROX referensfärg

    40 μl

    200 μl

    RNase-fri ddH2O

    1,7 ml

    10 ml

    Skriv ditt meddelande här och skicka det till oss