page_banner

Cell Total RNA Isolation Kit

Kitbeskrivning:

RNase-fri

Drivs i rumstemperatur (15-25 ℃)

Med DNA-rengöringskolonn

Högt RNA-utbyte

Snabbt: Avsluta extraheringen på 11 minuter

Säkerhet: Ingen Organisk kemikalie

foregene strength


  • :
  • Produktdetalj

    Produkttaggar

    FAQ

    Beskrivning

    Detta kit använder spin-kolonnen och formeln utvecklad av Foregene, som effektivt kan extrahera hög renhet och högkvalitativt totalt RNA från celler odlade i 96, 24, 12 och 6-brunnars plattor.

    Satsen tillhandahåller en effektiv DNA-rengöringskolonn, som enkelt kan separera supernatanten och cellysatet, binda och ta bort genomiskt DNA.Operationen är enkel och tidsbesparande.

    TKolumnen endast för RNA kan effektivt binda RNA med en unik formel.Ett stort antal prover kan bearbetas samtidigt.

    Kit komponenter

    Kit sammansättning RE-03111 RE-03114
    50 T 200 T
    Buffert cRL1* 25 ml 100 ml
    Buffert cRL2 15 ml 60 ml
    Buffert RW1* 25 ml 100 ml
    Buffert RW2 24 ml 96 ml
    RNase-fri ddH2O 10 ml 40 ml
    Kolumn endast RNA 50 200
    DNA-rengöringskolonn 50 200
    Instruktion 1 1

    *Bär handskar och vidta skyddsåtgärder under operationen eftersom buffert cRL1 och buffert RW1 innehåller irriterande kaotropiska salter.

    Egenskaper & fördelar

    ■ Hela processen drivs vid rumstemperatur (15-25 ℃), utan isbad och lågtemperaturcentrifugering.
    ■ Hela kitet är RNase-fritt, du behöver inte oroa dig för RNA-nedbrytning.
    ■ DNA-Cleaning Column binder specifikt DNA, så att kitet kan ta bort genomisk DNA-kontamination utan att lägga till ytterligare DNas.
    ■ Högt RNA-utbyte: Kolumn endast för RNA och unik formel kan effektivt rena RNA.
    ■ Snabb hastighet: lätt att använda och kan genomföras på 11 minuter.
    ■ Säkerhet: Inget organiskt reagens krävs.
    ■ Hög kvalitet: Det renade RNA:t är av hög renhet, fritt från protein och andra föroreningar och kan möta olika efterföljande experiment.

    advantages of foregene RNA Isolation kit

    Kitapplikation

    Den är lämplig för extraktion och rening av totalt RNA från odlade celler i 96, 24, 12 och 6-brunnars plattor.

    Arbetsflöde

    cell total RNA

    Diagram

    Cell Total RNA Isolation Kit Work Flow1

    Agarosgelbatteridiagrammet för Cell Total RNA Isolation Kit behandlade ovanstående olika antal celler, 20μl volymeluering, ta 2μl renat totalt RNA 1%.

    Lagring och hållbarhet

    Satsen kan förvaras i 12 månader i rumstemperatur (15–25 ℃) eller 2–8 ℃ under längre tid (24 månader).

    Buffert cRL1 kan lagras vid 4 ℃ i 1 månad efter tillsats av 2-hydroxi-1-etantiol (valfritt).


  • Tidigare:
  • Nästa:

  • RNA extraheras inte eller RNA-utbytena är låga

    Det finns ofta en mängd olika faktorer som påverkar återhämtningseffektiviteten, såsom: vävnadsprovets RNA-innehåll, arbetssätt, elueringsvolym, etc.

    1. Isbad eller kryogen (4 °C) centrifugering utfördes under drift.

    Rekommendation: Kör i rumstemperatur (15-25 ° C) under hela processen, isbad inte och centrifugera vid låga temperaturer.

    2. Felaktig provkonservering eller för lång provlagringstid.

    Rekommendation: Förvara prover vid -80 °C eller frys i flytande kväve och undvik upprepad frys-upptining;försök att använda färsk vävnad eller odlade celler för RNA-extraktion.

    3. Otillräcklig provlysering.

    Rekommendation: Vid homogenisering av vävnad, se till att vävnaden är tillräckligt homogeniserad och att vävnadscellerna är tillräckligt delade för att förklara frisättningen av RNA.

    4. Eluenten är inte tillsatt korrekt.

    Rekommendation: Bekräfta att RNase-Free ddH2O tillsätts droppvis till mitten av reningskolonnmembranet.

    5. Den korrekta volymen absolut etanol tillsattes inte buffert RL2 eller buffert RW2.

    Rekommendation: Följ instruktionerna, tillsätt korrekt volym absolut etanol till Buffer RL2 och Buffer RW2 och blanda väl innan du använder kitet.

    6. Dosering av vävnadsprov är inte lämplig.

    Rekommendation: Använd 10-20 mg vävnad eller (1-5) × 106celler per 500 μl buffert RL1, eftersom överdriven vävnadsanvändning kan resultera i minskad RNA-extraktion.

    7. Felaktig elueringsvolym eller ofullständig eluering.

    Rekommendation: Elueringsvolymen för reningskolonnen är 50-200 μl;om elueringseffekten inte är tillfredsställande, rekommenderas att förlänga placeringstiden i rumstemperatur efter tillsats av förvärmd RNase-fri ddH2O, t.ex. i 5-10 min.

    8. Reningskolonnen har etanolrester efter tvätt med buffert RW2.

    Rekommendation: Om det finns etanolrester efter tvättning av buffert RW2, centrifugering med tomma rör i 1 min, kan tiden för centrifugering med tomma rör ökas till 2 minuter, eller så kan reningskolonnen placeras i rumstemperatur i 5 minuter för att avlägsna resterna på lämpligt sätt etanol.

    Renat RNA bryts ned

    Kvaliteten på det renade RNA:t är relaterat till faktorer som bevarandet av provet, RNas-kontamination och manipulation, etc.

    1. Vävnadsprover hålls inte i tid.

    Rekommendation: Om vävnadsprover eller celler inte används i tid efter insamling, kryokonservera omedelbart vid -80 °C eller flytande kväve.För att extrahera RNA, använd ett nytaget vävnads- eller cellprov när det är möjligt.

    2. Upprepad frys-tinning av vävnadsprover.

    Rekommendation: När du lagrar vävnadsprover är det bäst att skära dem i små bitar för konservering och ta bort en av bitarna när du använder dem för att undvika upprepad frys-tinning av provet och nedbrytning av RNA.

    3. RNase införs eller inte bär engångshandskar, masker etc. under operationen.

    Rekommendation: RNA-extraktionsexperiment utförs bäst i separata RNA-manipulationsrum och bordet rensas före experimentet.

    Bär engångshandskar och -masker under experimentet för att minimera RNA-nedbrytning orsakad av införandet av RNas.

    4. Reagenser är kontaminerade med RNas under användning.

    Rekommendation: Ersätt med ett nytt Animal Total RNA Isolation Kit för relaterade experiment.

    5. Centrifugerören, spetsarna etc. som används vid RNA-manipulation är kontaminerade med RNas.

    Rekommendation: Bekräfta att de centrifugrör, spetsar, pipetter etc. som används vid RNA-extraktion alla är RNas-fria.

    Renat erhållet RNA påverkar experiment nedströms

    RNA renat av reningskolonnen, om saltjonerna, proteininnehållet är för stort kommer att påverka nedströmsexperimentet, såsom: omvänd transkription, Northern Blot et al.

    1. Det eluerade RNA:t har saltjonrester.

    Rekommendation: Bekräfta att rätt volym etanol har tillsatts till buffert RW2 och utför två reningskolonntvättar vid den centrifugalhastighet som anges för drift;om det finns någon rest av saltjoner, lämna reningskolonnen till buffert RW2 i 5 minuter vid rumstemperatur och utför centrifugering för att maximera avlägsnandet av saltkontamination.

    2. Etanolrest i eluerat RNA.

    Rekommendation: Bekräfta att efter tvättning av buffert RW2, utför centrifugeringsoperationen med tomma rör vid den centrifugeringshastighet som anges för drift, öka tiden för centrifugeringen av det tomma röret till 2 minuter om det fortfarande finns etanolrester, eller lämna det i rumstemperatur i 5 m

    Skriv ditt meddelande här och skicka det till oss