• Facebook
  • linkedin
  • Youtube
page_banner

Plant Total RNA Isolation Kit Plus Total RNA Purificaiton Kit för växt rik på polysackarider och polyfenoler

Kit Beskrivning:

 

Kat.nr. RE-05021/05022/05024

 

För rening av totalt RNA från allmänna växtprover innehållande höga polysackarider och polyfenolkomponenter.

Extrahera snabbt högkvalitativt totalt RNA från växtprover med högt innehåll av polysackarider och polyfenoler.

RNas-fri med användning av DNA-rengöringskolonn

Enkelt – alla operationer slutförs vid rumstemperatur

Snabb – operationen kan slutföras på 30 minuter

Säkert – inget organiskt reagens används föregen styrka


Produktdetalj

Produkttaggar

FAQ

LADDA NED RESURSER

Specifikationer

50 förberedelser, 200 förberedelser

Satsen använder spin-kolonnen och formeln utvecklad av Foregene, som effektivt kan extrahera hög renhet och högkvalitativt totalt RNA från olika växtvävnader med högt innehåll av polysackarider eller polyfenoler.Den tillhandahåller DNA-rengöringskolonnen som enkelt kan avlägsna genomiskt DNA från supernatanten och vävnadslysatet.Enbart RNA-kolonn kan effektivt binda RNA.Satsen kan behandla ett stort antal prover samtidigt.

Hela systemet innehåller inte RNas, så det renade RNA:t kommer inte att brytas ned.Buffert PRW1 och Buffer PRW2 kan säkerställa att det erhållna RNA:t inte är kontaminerat av protein, DNA, joner och organiska föreningar.

Kitkomponenter

Buffert PSL1, Buffert PS, Buffert PSL2

Buffert PRW1, Buffert PRW2

RNase-fri ddH2O, DNA-rengöringskolonn

RNA-Endast kolumn

Egenskaper & fördelar

■ Drift i rumstemperatur (15-25℃) under hela processen, utan isbad och lågtemperaturcentrifugering.
■ Komplett kit RNase-Free, ingen anledning att oroa sig för RNA-nedbrytning.
■ Särskilt lämplig för rening av RNA från växtprover av polysackarider och polyfenoler.
■ DNA-rengöringskolonn binder specifikt till DNA, så att kitet kan ta bort genomisk DNA-kontamination utan att lägga till DNas.
■ Högt RNA-utbyte: Kolumn endast för RNA och unik formel kan effektivt rena RNA.
■ Snabb hastighet: lätt att använda och kan genomföras inom 30 minuter.
■ Säkerhet: inget organiskt reagens krävs.
■ Hög kvalitet: De renade RNA-fragmenten är av hög renhet, fria från protein och andra föroreningar och kan uppfylla olika experimentella tillämpningar i nedströmsriktningen.

Produktparametrar

■ Nedströmsapplikationer: första-strängs cDNA-syntes, RT-PCR, molekylär kloning, Northern Blot, etc.
■ Prov: Färska eller frysta växtvävnader av polysackarider och polyfenoler
■ Dosering: 50mg växtvävnad
■ Maximal RNA-bindningskapacitet för reningskolonn: 80 μg
■ Elueringsvolym: 50-200 μl

Kitapplikation

Den är lämplig för extraktion och rening av totalt RNA från färska eller frysta växtvävnadsprover (särskilt färsk växtbladvävnad) med högt innehåll av polysackarider och polyfenoler.

Arbetsflöde

anläggningens totala RNA-enkelt arbetsflöde

Diagram

Plant Total RNA Isolation Kit Plus 6

Plant Total RNA Isolation Kit Plus behandlade 50 mg färska blad av polysackarider och polyfenoler, och 5 % renat RNA testades genom elektrofores.
1: Banan
2: Ginkgo
3: Bomull
4: Granatäpple

Lagring och hållbarhet

Detta kit kan förvaras i 24 månader under torra förhållanden vid rumstemperatur (15-25 ℃);om den behöver förvaras längre tid kan den lagras i 2–8℃.
Buffert PSL1 kan placeras vid 4 ℃ i 1 månad efter tillsats av β-merkaptoetanol (det rekommenderas att lägga till det samtidigt med experimentet).


  • Tidigare:
  • Nästa:

  • Kolonnen pluggade

    Efter att kolonnen pluggats är RNA-utbytet reducerat eller till och med omöjligt att rena RNA:t, och den erhållna RNA-massan är låg.

    Analys av vanliga orsaker:

    1. Provpauser är inte grundliga.

    Provbrott orsakar inte att DNA-RENSNINGSPOLUMN blockeras fullständigt, samtidigt som det påverkar RNA-utbytet och kvaliteten.Vi rekommenderar snabb malning i tillräckligt med flytande kväve när du bröt proverna. Försök att krossa provets cellvägg, cellmembran och annan vävnad.För växtprover av polyolpolysackarider rekommenderar vi att du använder Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS.

    2. När den separerade provsupernatanten sugs upp med DNA-rengöringskolonn, kan den eventuella cellfragmenterade fällningen inhaleras.

    De cellfragmenterade sedimenten som tas kommer att orsaka RNA-ONLY Column som kommer att blockeras när RNA-adsorptionsoperationen utförs (se steg 6).Vi rekommenderar att du försiktigt suger denna supernatant för att undvika att cellrester sugs.

    3. Provets initiala mängd är för mycket.

    Överdriven provanvändning kommer att resultera i ofullständig provfragmentering eller ofullständig cellys av buffert PSL1, vilket resulterar i blockering av reningskolonnen under rening.Plant Total RNA Isolation Kit Varje enskilt renat driftprov är 50 mg.För växtprover av polyolpolysackarider rekommenderar vi att du provar Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS.

    4. Centrifugens temperatur är för låg.

    Hela RNA-isolering och reningsprocessen utförs vid rumstemperatur (20-25°C), förutom att provvävnaden bryts av flytande kväve. Temperaturen i vissa kryogena centrifuger är lägre än 20, vilket kan orsaka blockering av DNA-rengöringskolonn och/eller endast RNA-kolonn.Om detta händer, ställ in centrifugtemperaturen på 20-25, ochse till att lysblandningen och/eller den etanoltillsatta supernatanten förvärmdes till 37°C.

    Inget RNA extraherat eller RNA-utbytet är lågt

    Det finns vanligtvis många faktorer som påverkar återvinningseffektiviteten, såsom: provets RNA-innehåll, operationsmetod, elueringsvolymen etc.

    Analys av vanliga orsaker enligt nedan:

    1. Ett isbad eller lågtemperatur (4°C) centrifugering utfördes under operationen.

    Förslag: Kör i rumstemperatur (15-25°C) under hela processen, gör inte isbad och lågtemperaturcentrifugering.

    2. RNA:t har försämrats på grund av felaktig konservering av provet eller långtidskonservering av provet.

    Rekommendation: Färskt insamlade prover bör snabbt frysas i flytande kväve och sedan förvaras vid -80°C under lång tid, undvik upprepad frysning och upptining av prover;eller omedelbart blötlägg proverna i RNA-stabilisator RNAlater-lösning (djurprover).

    3. Otillräcklig provfragmentering och lysering leder till blockering av reningskolonnen.

    Förslag: När du maler vävnaden, se till att vävnaden är tillräckligt mald och överför den snabbt till den förberedda bufferten PSL1 (bekräfta att rätt andel β-ME har tillsatts, se steg 1 i proceduren).

    4. Eluenten tillsattes felaktigt.

    Förslag: Se till att RNase-Free ddH2O droppas in i mitten av reningskolonnmembranet.

    5. Den korrekta volymen absolut etanol tillsattes inte buffert PSL2 eller buffert PRW2.

    Förslag: Följ instruktionerna, tillsätt korrekt volym absolut etanol till Buffer PSL2 och Buffer PRW2 och blanda väl innan kitet används.

    6. Mängden vävnadsprov är olämplig.

    Förslag: Använd 50 mg vävnad per 500 μl buffert PSL1.Användning av för mycket vävnad kommer att minska mängden extraherat RNA och renheten hos det resulterande RNA:t kommer också att minska.Vi rekommenderar starkt att den initiala provdosen inte bör överstiga 50 mg per RNA-extraktionsoperation.

    7. Olämplig elueringsvolym eller ofullständig eluering.

    Förslag: Elueringsvolymen i reningskolonnen är 50-200 μl;om elueringseffekten inte är tillfredsställande, rekommenderas att förlänga tiden vid rumstemperatur efter tillsats av förvärmd RNase-Free ddH2O, såsom 5-10 min.

    8. Reningskolonnen har etanolrester efter tvättning med BufferPRW2.

    Förslag: Om det tomma röret centrifugeras i 1 min och det fortfarande finns etanol kvar efter tvättning i Buffer PRW2, kan du öka tiden för det tomma rörets centrifugering till 2 min, eller placera reningskolonnen i rumstemperatur i 5 min för att helt avlägsna resterande etanol.

    9. Satsen användes felaktigt.

    Förslag: För växtprover av polyfenoliska polysackarider, med vanliga kit som Plant Total RNA Isolation Kit kanske inte kan erhållas idealiska RNA-prover.Vi rekommenderar att du använder Plant Total RNA IsolationKit Plus, som är speciellt utformat för polyfenoliska polysackarider växtprover.Ett kit speciellt utvecklat för att extrahera RNA från polyfenol- och polysackaridväxtprover.

    OD260/OD280-värdet är lågt

    RNA-eluering med ddH2O och används för spektrofotometeravläsningar resulterar i låga OD260/OD280-värden.Vi rekommenderar att du använder 10 mM Tris-HCl, pH 7,5 (istället för RNase-fri ddH2O för att eluera RNA) för att få relativt korrekta OD260/OD280-värden, se "RNA-koncentrations- och reningsanalyser" på sidan 19.

    Det renade RNA:t bryts ned

    Kvaliteten på renat RNA är relaterad till faktorer som provkonservering, RNas-kontamination och manipulation.

    Analys av vanliga orsaker:

    1. Vävnadsprover lagrades inte i tid efter insamling.

    Rekommendation: Om vävnadsproverna inte används i tid efter insamling, vänligen förvara dem i flytande kväve vid låg temperatur omedelbart eller överför dem till -80°C för långtidsförvaring efter snabbfrysning i flytande kväve, eller sänk omedelbart ner proverna i RNA-stabilisator RNAlater-lösning (djurprover).För RNA-extraktion, försök att använda nyligen insamlade vävnadsprover.

    2. Upprepad frysning och upptining av vävnadsprover.

    Förslag: När du lagrar vävnadsprover är det bäst att skära dem i små bitar för konservering och ta ut en del av dem när du använder dem för att undvika nedbrytning av RNA orsakad av upprepad frysning och upptining av proverna.

    3.RNase införs i operationsrummet eller ej bära engångshandskar, masker, etc.

    Förslag: RNA-extraktionsexperiment utförs bäst i separata RNA-operationer, och laboratoriebordet bör rengöras före experimentet, och engångshandskar och -masker bör bäras under experimentet för att undvika RNA-nedbrytning orsakad av införandet av RNas i största utsträckning.

    4.Reagenset är kontaminerat av RNase under användning.

    Förslag: Ersätt med en ny serie av växt-total-RNA-extraktionssatser för relaterade experiment.

    5. Centrifugrören och pipettspetsarna som används för RNA-manipulation är kontaminerade med RNas.

    Förslag: Se till att centrifugrören, pipettspetsarna, pipetter, etc. som används vid RNA-extraktion alla är RNase-fria.

    Instruktionsmanualer:

    Plant Total RNA Isolation Kit Plus Instruktionsmanual

     

    Skriv ditt meddelande här och skicka det till oss