Lnc-RT Heroᵀᴹ I(Med gDNas)(Super Premix för första-strängs cDNA-syntes från lncRNA)
Specifikationer
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (Med gDNase) är ett omvänd transkriptionssystem speciellt utvecklat för lncRNA för att snabbt ta bort genomisk DNA-kontamination.5×gDNase Mix kan snabbt ta bort det återstående genomet i RNA vid 42°C i 2 minuter, vilket effektivt undviker störning av genomet på qPCR-resultat.
5×L-RT HeroTM Mix innehåller Foregene LncRNA Reverse Transcriptase speciellt utvecklat av Foregene, vilket är en ny typ av omvänt transkriptas specifikt för lncRNA och andra långa RNA-komplexmallar, med starkare RNA-affinitet och högre reverseringsregistreringseffektivitet.Det optimerade systemet gör den omvända transkriptionshastigheten snabbare och kan enkelt transkribera RNA-mallar med högt GC-innehåll och komplex sekundär struktur.Syntesen av den första strängens cDNA kan fullbordas vid 42°C på 15 minuter.
Kitkomponenter
| 5× gDNase-blandning |
| 5× L-RT HeroTM Mix |
| RNas-fri ddH2O |
| Instruktioner |
Egenskaper & fördelar
■Effektiv förmåga att ta bort gDNA, vilket kan ta bort gDNA i mallen inom 2 minuter.
■ Det kan effektivt reversera transkription av lncRNA.När den omvända transkriptionsprodukten utsätts för qPCR är Ct-värdet lägre än det för konventionella omvänd transkriptionssystem.
■ Effektivt omvänd transkriptionssystem, det tar bara 15 minuter att slutföra syntesen av den första strängens cDNA.
■ Komplexa mallar: mallar med högt GC-innehåll och komplex sekundär struktur kan också vändas med hög effektivitet.
■ Högkänsligt omvänt transkriptionssystem, mallar på pg-nivå kan också få cDNA av hög kvalitet.
■ Det omvända transkriptionssystemet har hög termisk stabilitet, den optimala reaktionstemperaturen är 42℃, och den har fortfarande bra omvänd transkriptionsprestanda vid 50℃.
Kitapplikation
lncRNA relativ kvantitativ analys.
lncRNA absolut kvantitativ analys.
Den kan snabbt och exakt analysera spår-RNA såsom RNA-virus.
Omvänd transkription av RNA-mallar med högt GC-innehåll eller komplex sekundär struktur.
Arbetsflöde
Lagring och hållbarhet
Satsen bör förvaras vid -20°C. Förvara produkten i ett kylskåp med konstant temperatur vid -20°C°C omedelbart efter mottagandet.Om lagringsförhållandena är lämpliga kommer produkten inte att försämra någon prestanda under den 1-åriga giltighetsperioden.
Guide för problemanalys
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-specifik förstärkning
1. Orimlig primerdesign
Rekommendation: Designa primers enligt primer designprinciper.
2. Genomrester.
Förslag: Se till att det första steget av reaktionstemperaturen för gDNA-borttagning är 42°C, och att reaktionstiden också kan förlängas till 5 min.
Ingen förstärkningssignal med RT-qPCR
1. RNA bryts ned.
Rekommendation: Materialet för RNA-extraktion bör vara så färskt som möjligt och RNA av hög kvalitet och hög renhet bör användas.
2. RNA innehåller inhibitorer.
Rekommendation: Hämmare av omvänd transkription inkluderar vanligtvis SDS, guanidinsalter, EDTA, etc. Det rekommenderas att tvätta RNA-fällningen med 70 % etanol för att avlägsna hämmarna.
3. Grundläggande designfrågor.
Rekommendation: Enligt principen om primerdesign, designa om primers för inspektion.
Målbandet visas i den tomma kontrollen
1. Kontaminering av driftverktyg eller reagens.
Rekommendation: Alla reagenser eller utrustning för experimentet bör autoklaveras.Var försiktig och varsam vid hantering för att förhindra att DNA-prov sugs in i pipetten eller spills ut ur centrifugröret.
2. Kontaminering inträffade under beredningen av PCR-reaktionssystemet.
Rekommendation: Vidta nödvändiga försiktighetsåtgärder vid hantering, såsom: bära latexhandskar, använda filterspetsar.Använd Real Time PCR Mix i ett kontamineringssäkert system.
3. Primerna bryts ned.
Förslag: Använd SDS-PAGE-elektrofores för att detektera om primrarna är nedbrutna och ersätt med nya primers för fluorescensdetektionsexperiment.
Bruksanvisning:
