Direkt RT-qPCR Kit
Kit Beskrivning:
◮ Direct RT-qPCR Kit, med hjälp av Foreasy Reverse Transcriptase och Foreasy HS Taq DNA Polymerase utvecklat av Foregene, med unik reaktionsbuffert, gör detta kit med stark resistens och kompatibilitet, och det kan direkt testa reaktionen med Foregene Lysis-system som mall.Detta kit kan gälla för utveckling av nukleinsyradetektionskit för covid-19 och andra patogena bakterier.
Beskrivning
Direct RT-qPCR Kit tillhandahåller separat förpackad RT-qPCR-buffert och högeffektivt enzymblandning (Taq、M-MLV、RI), vilket gör det bekvämt för att skapa back-end-kit och systemjustering, inom enkel verifiering.
Specifikationer
500T, 50.000T
Kitkomponenter
| Kit innehåll (20 μL reaktionssystem) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T | 50 000 T | |
| Direkt enzymblandning | 500 μL×1 | 50 ml×1 |
| 2× Direkt RT-qPCR-buffert | 1 ml×5 | 500 ml×1 |
| Instruktion | 1 | 1 |
Driftssteg
Innan reagensberedning ska alla reagenser i kitet tinas i rumstemperatur och blandas försiktigt.
A: Förbereda of mall och reagens
1. Förbered förberedd RNA-mall (det rekommenderas att använda Foregene Total RNA Isolation Kit-serien för att extrahera och rena RNA-mall) eller provkrackningsprodukt (det rekommenderas att använda Foregene Lysis-system), specifika primers (10 μM) och andra relevanta förbrukningsvaror, instrument.
2. Sätt i 2× Direct RT-qPCR-bufferten, RNase-Free ddH2O och 20× ROX Reference Dye (om det'behövs) i lådan med is, vilket gör att dessa smälter naturligt och blandas försiktigt.
B: Förbereda of RT-qPCR systemet
Tabell 1 : Förbereda of RT-qPCR ssystem
| Komponent | Volym | Slutlig koncentration |
| 2× Direkt RT-qPCR-buffert | 10 μL | 1× |
| Direkt enzymblandning | 1μL | |
| Forward Primer (10 μM) | 0,8 μL | 50-900 nM |
| Reverse Primer (10 μM) | 0,8 μL | 50-900 nM |
| Sond (4 μM) | 1μL | 200 nM |
| Mall (RNA eller lysat) | X μL | |
| 20×ROX referensfärg | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6,4-X) μL | |
| Total volym | 20μL |
C: Uppsättning de RT-qPCR reaktion program
Tabell 2 : RT-qPCR reaction program miljö (för exempel: två-steg metod)
| Steg | Temperatur | Tid | Cyklar | Innehåll | |
| 1 | 50 ℃ | 15 min | 1* | 1 | Omvänd transkription |
| 2 | 95 ℃ | 1 min | 1 | Fördenaturering | |
| 3 | 95 ℃ | 10 sek | 40-45 | Denaturering | |
| 60 ℃ | 30 sek 2* | Glödgning/förlängning | |||
Lagring och hållbarhet
-Kitet bör förvaras vid -20± 5℃.Giltighetstiden är 12 månader.
-Undvik upprepade frys-upptiningscykler (<5 cykler).
