ForeDirect RT-qPCR Kit
Beskrivning
ForeDirect RT-qPCR Kit är designat för RNA-direkt amplifiering i realtid från svabbsamlingar utan RNA-reningsprocesser.Detta kit slutför qRT-PCR-cyklerna inom en timme.Enzymblandningen är en optimerad blandning av omvänt transkriptas, Hot-Start Taq DNA-polymeras, RNase-hämmare.Reaktionsbufferten innehåller alla nödvändiga komponenter, inklusive optimerade buffertkomponenter, Mg2+, dUTP och dNTP.
Specifikationer
100T
Kitkomponenter
Nukleinsyrafrisättningsmedel |
RNA-skyddsmedel |
2× RT-qPCR-buffert |
Enzymblandning (Taq&M-MLV) |
Instruktioner |
PCR-applikation
1. När PCR-reaktionsrören har centrifugerats kort, placera dem i provtanken på amplifieringsinstrumentet.
2. Termiskt protokoll
Steg | Temperatur | Tid | Cyklar | |
1 | Omvänd transkription | 50 ℃ | 15 minuter | 1 |
2 | Fördenaturering | 95 ℃ | 1 min | 1 |
3 | Denaturering | 95 ℃ | 10 sekunder | 42 |
4 | Glödgning/förlängning | 60 ℃ | 30 sekunder |
Notera:Fluorescerande signal detekterades omedelbart efter förlängningssteget av varje cykel.
3. Efter inställning, spara filen och kör reaktionsprogrammet.
Driftssteg
Innan reagensberedning ska alla reagenser i kitet tinas i rumstemperatur och blandas försiktigt.
Reagensberedning
1. Förbered nukleinsyrafrisättningsblandningen
Komponent | Volym per prov eller kontroll |
Nukleinsyrafrisättningsmedel | 5 μL |
RNA-skyddsmedel | 0,5 μL |
2. Förbered reaktionsblandningen
Komponent | Volym per prov eller kontroll |
2× RT-qPCR-buffert | 15 μL |
Enzymblandning (Taq&M-MLV) | 1,5 μL |
Primers och sonder | 1 μL |
Lagring och hållbarhet
-Kitet bör förvaras vid -20± 5℃.Giltighetstiden är 12 månader.
-Undvik upprepade frys-upptiningscykler (<5 cykler).