Direct RT-qPCR Kit III
Kit Beskrivning:
◮Direct RT-qPCR Kit, med hjälp av Foreasy Reverse Transcriptase och Foreasy HS Taq DNA Polymerase utvecklat av Foregene, med unik reaktionsbuffert, gör detta kit med stark resistens och kompatibilitet, och det kan direkt testa reaktionen med Foregene Lysis-system som mall.Detta kit kan gälla för utveckling av nukleinsyradetektionskit för covid-19 och andra patogena bakterier.
Beskrivning
Direct RT-qPCR Kit tillhandahåller separat förpackad RT-qPCR-buffert (med Foreasy HS Taq DNA-polymeras blandat) och högeffektivForeasy omvänt transkriptas (MMLV),vilket gör det bekvämt för att skapa back-end-kit och systemjustering, inom enkel verifiering.
Direct RT-qPCR Kit, med hjälp av Foreasy Reverse Transcriptase och Foreasy HS Taq DNA Polymerase utvecklat av Foregene, med unik reaktionsbuffert, gör detta kit med stark resistens och kompatibilitet, och det kan direkt testa reaktionen med Foregene Lysis-system som mall.Detta kit kan gälla för utveckling av nukleinsyradetektionskit för covid-19 och andra patogena bakterier.
Detta kit kan direkt vara en del av IVD-produkten, enkelt och snabbt.Det behöver bara en enkel verifiering, utan att utvecklas igen.
Specifikationer
500T, 50.000T
Kitkomponenter
| Kit innehåll (20 μL reaktionssystem) | IM-05111-03 | IM-05112-03 |
| 500 T | 50 000 T | |
| Foreasy Romvänd transkriptas(200 U/μL) | 50 μL×1 | 1 ml×5 |
| 2× Direct qPCRMix-Taqman | 1 ml × 5 | 500 ml×1 |
| Instruktion | 1 | 1 |
Driftssteg
S: Förbered mall och reagens
1. Förbered förberedd RNA-mall (det rekommenderas att använda Foregene Total RNA Isolation Kit-serien för att extrahera och rena RNA-mall) eller provkrackningsprodukt (det rekommenderas att använda Foregene Lysis-system), specifika primers (10 μM) och andra relevanta förbrukningsvaror, instrument.
2. Lägg 2× Direct RT-qPCR-bufferten, RNase-Free ddH2O och 20× ROX Reference Dye (om det behövs) i lådan med is, så att dessa smälter naturligt och blandas försiktigt.
B: Förbered RT-qPCR-system
Få halva volymen reaktionsbuffert i reaktionssystemet (om systemets volym till exempel är 20 μL måste det få 10 μL 2× Direct RT-qPCR-buffert). Förmotsvarande mängd enzym, det föreslår viM-MLV：10-30 U/20 μL reaktionssystem,TaqDNA-polymeras:1-2 U/20 μL reaktionssystemdetta är vårt förslag, du bör testa och justera det), tillsätt RNA-mall, specifika primrar och prober och tillsätt RNas-fri ddH2O till 20 μL.Den specifika beredningen av RT-qPCR-reaktionssystem kan hänvisas till följande tabell 1.
Tabell 1: Förbered RT-qPCR-systemet
| Komponent | Volym | Slutlig koncentration |
| 2× Direkt RT-qPCR-buffert | 10 μL | 1× |
| Foreasy omvänt transkriptas (MMLV) | 10-30 U | |
| Foreasy HS Taq DNA-polymeras | 1-2 U | |
| Forward Primer (10 μM) | 0,8 μL | 50-900 nM |
| Reverse Primer (10 μM) | 0,8 μL | 50-900 nM |
| Sond (4 μM) | 1 μL | 200 nM |
| Mall (RNA eller lysat) | X μL | |
| 20× ROX referensfärg | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6,4-X) μL | |
| Total volym | 20 μL |
Obs: Forward Primer och Reverse Primer är specifika primrar för målgenen.Systemet för qPCR kan justeras enligt praktiska experimentella och PCR-modeller.Vi rekommenderar 400nM för den slutliga koncentrationen av de flesta primers.Justera volymen av specifika primrar och prober enligt den beredda koncentrationen och den rekommenderade slutliga koncentrationen, tack.
1*: Välj lämplig slutkoncentration av ROX Reference Dye enligt olika kvantitativa PCR-instrument.Den optimala ROX Reference Dye-koncentrationen för vanliga kvantitativa PCR-instrument visas i följande tabell:
| Kvantitativa PCR-instrument | Slutlig koncentration av ROX Reference Dye |
| ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT/Steg ett,etc. | 1× (tillsätt till exempel 1μl 20×ROX referensfärg i 20 μL reaktionssystem) |
| ABI 7500, 7500 Fast, Stratagene Mx3000P, Mx3005P och Mx4000, etc. | 0,5× (tillsätt till exempel 0,5 μl 20×ROX referensfärg i 20 μL reaktionssystem) |
| Roche PCR-instrument, Bio-Rad PCR-instrument, Eppendorf kvantitativt PCR-instrument, etc. | Utan ROX Reference Dye |
Lagring och hållbarhet
Satsen ska förvaras vid -20 ± 5 ℃.Den ska omedelbart förvaras i -20℃ termostatisk kyl.Giltighetstiden är 2 år om den förvaras i lämpligt skick.
