Grossistförsäljare av professionella magnetiska virala RNA nukleinsyraisoleringsrening färdigförpackade kit
Vi tänker och övar alltid i enlighet med förändringen av omständigheterna och växer upp.Vi strävar efter att uppnå ett rikare sinne och kropp samt levande för grossister av professionella magnetiska virala RNA nukleinsyraisoleringsrening förpackade kit, Vårt företag utför med procedurprincipen "integritetsbaserat, skapat samarbete, folkorienterat, win-win-samarbete".Vi hoppas att vi lätt kan ha ett trevligt samarbete med affärsmän från hela miljön.
Vi tänker och övar alltid i enlighet med förändringen av omständigheterna och växer upp.Vi syftar till att uppnå ett rikare sinne och kropp samt att leva förKina Universal RNA DNA-reagens och automatisk nukleinsyrarening, Vi strävar efter att möta kraven från våra kunder globalt.Vårt utbud av varor och tjänster utökas kontinuerligt för att möta kundernas krav.Vi välkomnar nya och gamla kunder från alla samhällsskikt att kontakta oss för framtida affärsrelationer och för att uppnå ömsesidig framgång!
Instruktionsmanualer:
Vi tänker och övar alltid i enlighet med förändringen av omständigheterna och växer upp.Vi strävar efter att uppnå ett rikare sinne och kropp samt levande för grossister av professionella magnetiska virala RNA nukleinsyraisoleringsrening förpackade kit, Vårt företag utför med procedurprincipen "integritetsbaserat, skapat samarbete, folkorienterat, win-win-samarbete".Vi hoppas att vi lätt kan ha ett trevligt samarbete med affärsmän från hela miljön.
Grossisthandlare avKina Universal RNA DNA-reagens och automatisk nukleinsyrarening, Vi strävar efter att möta kraven från våra kunder globalt.Vårt utbud av varor och tjänster utökas kontinuerligt för att möta kundernas krav.Vi välkomnar nya och gamla kunder från alla samhällsskikt att kontakta oss för framtida affärsrelationer och för att uppnå ömsesidig framgång!
Guide för problemanalys
Följande analys av de problem du kan stöta på iAnläggning totaltRNA extraction will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.
Spinnkolonnen är igensatt
Blockering av spinnkolonnen kommer att göra att RNA-utbytet reduceras eller till och med inte kan renas för att erhålla RNA, och kvaliteten på det erhållna RNA:t kommer att vara låg.
Analys av vanliga orsaker:
1. Provet är inte brutet helt.
Ofullständig provfragmentering kan blockera DNA-rengöringskolonnen, vilket också kan påverka RNA-utbyte och kvalitet.Vi rekommenderar att när du utför provfragmentering, snabbt mala in tillräckliga mängder flytande kväve för att bryta upp vävnader som cellväggar och cellmembran i proverna så mycket som möjligt.För växtprover av polyfenolpolysackarider rekommenderar vi att du använder Plant Total RNA Isolation Kit Plus.
2.Aspirera den isolerade supernatanten från DNA-rengöringskolonnen, aspirera eventuell cellrester.
Aspirerad cellskräppellet kan täppa till kolumnen endast för RNA under RNA-adsorptionsprocedurer (se steg 5 i proceduren, steg 6 i polysackaridpolyfenolproceduren).Vi rekommenderar att man måste vara försiktig när man aspirerar denna supernatant för att undvika att cellrester aspireras.
3. Den initiala mängden prov är för stor.
Överdriven provanvändning kommer att resultera i ofullständig provfragmentering eller ofullständig lysering av celler av buffert PRL1 eller buffert PSL1, vilket resulterar i en igensatt reningskolonn för reningsoperationer.Plant Total RNA Isolation Kit har ett initialt maximum på 50 mg per enstaka rening av ett opererat prov.För växtprover av polyfenolpolysackarider rekommenderar vi att du provar Plant Total RNA Isolation Kit Plus.
4. Centrifugens temperatur är för låg.
Hel RNA-isolering och rening förutom flytande kväveavbrott av provvävnad, utförs alla steg vid rumstemperatur (20-25 °C).Vissa lågtemperaturcentrifuger har temperaturer under 20 °C, vilket kan orsaka blockeringar i DNA-rengöringskolonnen och/eller endast RNA-kolumnen.Om detta inträffar, ställ in centrifugtemperaturen till 20-25 °C och förvärm lysblandningen och/eller tillsatsen av etanolseparationssupernatant till 37 °C.
Inget RNA extraherat eller RNA-utbytet är lågt
Det finns vanligtvis många faktorer som påverkar återvinningseffektiviteten, såsom: provets RNA-innehåll, operationsmetod, elueringsvolymen etc.
Analys av vanliga orsaker enligt nedan:
1. Ett isbad eller lågtemperatur (4°C) centrifugering utfördes under operationen.
Förslag: Kör i rumstemperatur (15-25°C) under hela processen, gör inte isbad och lågtemperaturcentrifugering.
2.RNA:t har brutits ned på grund av felaktig konservering av provet eller långtidskonservering av provet.
Rekommendation: Färskt insamlade prover bör snabbt frysas i flytande kväve och sedan förvaras vid -80°C under lång tid, undvik upprepad frysning och upptining av prover;eller omedelbart blötlägg proverna i RNA-stabilisator RNAlater-lösning (djurprover).
3.Otillräcklig provfragmentering och lysering leder till blockering av reningskolonnen.
Förslag: När du maler vävnaden, se till att vävnaden är tillräckligt mald och överför den snabbt till den förberedda bufferten PSL1 (bekräfta att rätt andel β-ME har tillsatts, se steg 1 i proceduren).
4. Eluenten tillsattes felaktigt.
Förslag: Se till att RNase-Free ddH2O droppas in i mitten av reningskolonnmembranet.
5. Den korrekta volymen absolut etanol tillsattes inte buffert PSL2 eller buffert PRW2.
Förslag: Följ instruktionerna, tillsätt korrekt volym absolut etanol till Buffer PSL2 och Buffer PRW2 och blanda väl innan kitet används.
6. Mängden vävnadsprov är olämplig.
Förslag: Använd 50 mg vävnad per 500 μl buffert PSL1.Användning av för mycket vävnad kommer att minska mängden extraherat RNA och renheten hos det resulterande RNA:t kommer också att minska.Vi rekommenderar starkt att den initiala provdosen inte bör överstiga 50 mg per RNA-extraktionsoperation.
7. Olämplig elueringsvolym eller ofullständig eluering.
Förslag: Elueringsvolymen i reningskolonnen är 50-200 μl;om elueringseffekten inte är tillfredsställande, rekommenderas att förlänga tiden vid rumstemperatur efter tillsats av förvärmd RNase-fri ddH2O, som 5-10 min.
8. Reningskolonnen har etanolrester efter tvättning med buffert PRW2.
Förslag: Om det tomma röret centrifugeras i 1 min och det fortfarande finns etanol kvar efter tvättning i Buffer PRW2, kan du öka tiden för det tomma rörets centrifugering till 2 min, eller placera reningskolonnen i rumstemperatur i 5 min för att helt avlägsna resterande etanol.
9. Satsen användes felaktigt.
Förslag: För växtprover av polyfenoliska polysackarider, med vanliga kit som Plant Total RNA Isolation Kit kanske inte kan erhållas idealiska RNA-prover.Vi rekommenderar att du använder Plant Total RNA IsolationKit Plus, som är speciellt utformat för polyfenoliska polysackarider växtprover.Ett kit speciellt utvecklat för att extrahera RNA från polyfenol- och polysackaridväxtprover.
OD260/OD280-värdet är lågt
RNA-eluering med ddH2O och används för spektrofotometeravläsningar resulterar i låga OD260/OD280-värden.Vi rekommenderar att du använder 10 mM Tris-HCl, pH 7,5 (istället för RNase-fri ddH2O för att eluera RNA) för att erhålla relativt korrekta OD260/OD280-värden, se "RNA-koncentrations- och reningsanalyser" på sidan 19.
Det renade RNA:t bryts ned
Kvaliteten på renat RNA är relaterad till faktorer som provkonservering, RNas-kontamination och manipulation.
Analys av vanliga orsaker:
1. Vävnadsprover lagrades inte i tid efter insamling.
Rekommendation: Om vävnadsproverna inte används i tid efter insamling, vänligen förvara dem i flytande kväve vid låg temperatur omedelbart eller överför dem till -80°C för långtidsförvaring efter snabbfrysning i flytande kväve, eller sänk omedelbart ner proverna i RNA-stabilisator RNAlater-lösning (djurprover).För RNA-extraktion, försök att använda nyligen insamlade vävnadsprover.
2. Upprepad frysning och upptining av vävnadsprover.
Förslag: När du lagrar vävnadsprover är det bäst att skära dem i små bitar för konservering och ta ut en del av dem när du använder dem för att undvika nedbrytning av RNA orsakad av upprepad frysning och upptining av proverna.
3.RNase införs i operationsrummet eller ej bära engångshandskar, masker, etc.
Förslag: RNA-extraktionsexperiment utförs bäst i separata RNA-operationer, och laboratoriebordet bör rengöras före experimentet, och engångshandskar och -masker bör bäras under experimentet för att undvika RNA-nedbrytning orsakad av införandet av RNas i största utsträckning.
4.Reagenset är kontaminerat av RNase under användning.
Förslag: Ersätt med en ny serie av växt-total-RNA-extraktionssatser för relaterade experiment.
5. Centrifugrören och pipettspetsarna som används för RNA-manipulation är kontaminerade med RNas.
Förslag: Se till att centrifugrören, pipettspetsarna, pipetter, etc. som används vid RNA-extraktion alla är RNase-fria.
Instruktionsmanualer:
