Introduktion:

RNA-molekyler kan interagera i stor utsträckning med andra biologiska molekyler, såsom protein, DNA och RNA, och existerar således i celler och organismer i form av makromolekylära komplex.Bland dem är RNA-proteinkomplex förekomsten och funktionen av RNA En av de viktiga formerna av.RNA pull-down är en klassisk metod för screening och identifiering av RNA-molekyler, särskilt de interagerande proteinerna i lncRNA-molekyler, och är erkänd av majoriteten av forskare och internationella auktoritativa akademiska tidskrifter.Idag kommer FORREGENE att dela med dig av den experimentella principen och den tekniska processen för RNA-neddragning, kanske du kan använda den

1. Den experimentella principen för RNA pull down-teknologi:

In vitro-transkription och syntes av biotinmärkta mål-lncRNA- eller lncRNA-fragment (inklusive RNA-fragment som används som positiva och negativa kontroller), och inkubera med cellextrakt;använd avidin-förankrade magnetiska pärlor för att samla RNA-protein- eller RNA-RNA-komplex. Efter noggrann tvättning elueras komplexet.Om du detekterar proteinmålmolekylen som interagerar med lncRNA, utför proteinelektrofores på RNA-pull-down-produkten, detektera målproteinet genom silverfärgning och skär gelén för masspektrometri;utför även western blot-verifiering direkt på den neddragbara produkten;om det detekteras För RNA-målmolekyler som interagerar med lncRNA, utsätts RNA-pull-down-produkter för RNA-extraktion och specifik qRT-PCR-detektion utförs.

2. Process för RNA pull-down teknologiexperiment:

3. Teknisk service för RNA-neddragning av FOREGENE:

Cell kultur

Framställning av celltotal/nukleärt/plasmaproteinextrakt

RNA pull down experiment

SDS-PAGE elektrofores, silverfärgning

Masspektrometri och WB-experiment

Experimentell rapport

4. Experimentellt fall

Följande figur visar resultaten av FJ Bio-Bios RNA pull down och SDS-PAGE elektroforesdetektion, där den röda pilen markerar skillnadsbandet:

Forskargruppen av professor Song Xu vid Sichuan University har samlat på sig 15 års långvarig ackumulering inom området lncRNA-forskning.Foregene Bio och professor Song Xus forskargrupp samarbetade för att lansera RNA pull down-teknologin för lncRNA, vilket kommer att ge dig ett tillfredsställande resultat för ditt experiment.