Hot-start Taq enzym används i stor utsträckning.Jämfört med vanligt DNA-polymeras kan hot-start Taq-enzym effektivt undvika viss ospecifik amplifiering och bildning av primerdimerer, och kan effektivt förbättra framgångshastigheten för målgenamplifiering.Särskilt inom området för genetisk testning har hot-start Taq-enzym identifierats som en obligatorisk standard i industrin, och vanligt DNA-polymeras bör inte användas.Som framgår av ovanstående används varmstartade Taq-enzymer i stor utsträckning.För närvarande finns det många märken av hetstartade Taq-enzymer på hemmamarknaden, men det finns inte många hetstartade Taq-enzymer med hög kvalitet.Inför så många hetstartade Taq-enzymprodukter, hur ska vi välja?

1. Välj det varmstartade Taq-enzymet med hög amplifieringseffektivitet

PCR-amplifieringseffektiviteten är nära relaterad till prestandan hos Taq-enzym.Efter att ett bra Taq-enzymreaktionssystem har optimerats är amplifieringseffektiviteten över 95 % och amplifieringsintervallet för den initiala mallmängden är brett.Tillfredsställande amplifiering kan erhållas när målgenhalten är låg, och det är inte lätt att bli förgiftad när mallmängden är hög och den exponentiella amplifieringsperioden är lång.För Taq-enzymet med dålig prestanda, även om reaktionssystemet har optimerats många gånger, är amplifieringseffektiviteten fortfarande mindre än 90%, "S"-formen på amplifieringskurvan är inte uppenbar, lutningen är liten och kurvan är platt.När mängden mall är låg kan den inte förstärkas, och när mängden mall är hög är amplifieringseffekten inte idealisk.Därför är valet av DNA-polymeraser med hög amplifieringseffektivitet avgörande för framgången med PCR och qPCR.

2. Välj varmstartat Taq-enzym med stark enzymkraft

Den enzymatiska kraften hos Taq-enzymet är relaterad till amplifieringseffektiviteten.Generellt gäller att ju starkare den enzymatiska kraften hos hot-start Taq-enzymet är, desto längre exponentiell tillväxtperiod för PCR-amplifiering, desto mer typisk "S-formad" kurva, desto högre fluorescenssignalvärde och desto mer lämpad för multiplex PCR-detektion.Brand DNA-polymeraser med svag enzymatisk kraft kan i allmänhet bara stödja 2-plex-reaktioner.När man gör 3-plex-reaktioner är amplifieringskurvan låg, fluorescenssignalvärdet är lågt och det finns ingen typisk amplifieringskurva, så resultaten är svåra att bedöma.

3. Välj ett varmstartat Taq-enzym med hög känslighet

Generellt sett har DNA-polymeras hög amplifieringseffektivitet och hög känslighet, men det finns också inkonsekvenser.Om målgenförekomsten i provet som ska amplifieras är låg, rekommenderas det att testa amplifieringskänsligheten för Taq-enzymet.Den vanligaste detektionsmetoden är att utföra 10- eller 5-faldig gradientspädning av målgenens plasmidfragment, utföra PCR-detektion vid den lägre utspädningen och välja hot-start Taq-enzymet med högre detektionskänslighet.

Av ovanstående framgår att forskare behöver välja efter sina egna experimentella krav och finansieringsvillkor.Det är bäst att göra ett amplifieringsexperiment med gradientutspädning för att upptäcka amplifieringseffektiviteten och känsligheten hos hot-start Taq-enzymet.

Ett exempel på Foregene's Taq DNA-polymeras:

Foreasy HS Taq DNA-polymeras

Beskrivning

Foreasy HS Taq DNA-polymeras är ett DNA-polymeras uttryckt i Escherichia coli-teknikbakterier genom genrekombinationsteknologi.Enzymet kombineras med en unik reaktionsbuffert, vilket gör produkten mycket resistent och kompatibel, och kan direkt använda provlysatet (Foregene Lysis-systemet) som mall för detektionsreaktioner.

Ansökan

Kvalitativ PCR och kvantitativ PCR-detektion av renade mallar och icke-renade mallar.

Kvalitetskontroll

1. Ingen exogen nukleasaktivitet upptäcktes

2.PCR-metod för att detektera kvarvarande genomiskt DNA utan värd

3. Det kan effektivt amplifiera enkelkopiagener i det mänskliga genomet

4. Förvara i rumstemperatur i en vecka, inga uppenbara aktivitetsförändringar

Produktinformation: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/