Bygger SOP System

Upprätta PCR-experiment-SOP för att standardisera experimentpersonalens beteende.

Försöksledarna följer strikt driftsprocedurerna och minimerar PCR-föroreningar som kan orsakas av mänskliga faktorer eller förhindrar uppkomsten av föroreningar i verksamheten.Dessutom bör försöksledaren ha motsvarande yrkeskunskaper och färdigheter, inklusive färdigheter i att använda relaterad utrustning, klargöra hela arbetsprocessen, behärska behandlingsmetoderna för kontaminering och laboratoriekvalitetskontrollmetoder och att kunna tolka testresultaten korrekt.

Building Standard PCR Laboratory

PCR-laboratoriet är i princip indelat i fyra områden, nämligen reagensberedningsområde, provbearbetningsområde, amplifieringsområde och amplifieringsproduktanalysområde.De två första områdena är förförstärkningsområden och de två sista områdena är områden efter förstärkning.Förförstärkningszonen och postförstärkningszonen bör vara strikt åtskilda.Experimentmaterial, reagens, registreringspapper, pennor, rengöringsmaterial etc. kan bara flöda från förförstärkningsområdet till området efter förstärkningen, det vill säga från området för reagensberedning, provbehandlingsområdet, förstärkningsområdet och analysområdet för amplifieringsprodukten, och får inte flyta i motsatt riktning.Luftflödet i laboratoriet bör också flöda från förförstärkningsområdet till området efter förstärkningen, inte i motsatt riktning.

Minska experimentella steg

Om laboratoriet endast utför PCR-detektion och identifiering, rekommenderas att använda fluorescerande kvantitativ PCR istället för konventionell PCR.

Fluorescenskvantitativa PCR-detektionsresultat kan samlas in och analyseras med fluorescerande signaler, så det finns inget behov av att öppna locket för elektrofores efter reaktionen, vilket undviker kontaminering av PCR-produkter som orsakas av läckage av reaktionsprodukter för att bilda aerosoler.Om du ökar antalet locköppningar under laddningssteget av gelelektrofores, kommer aerosolförorening sannolikt att inträffa.Det rekommenderas att främja tillämpningen av kvantitativ PCR och gradvis ersätta kvalitativ PCR.

Anta UNG anti-föroreningssystem

UNG anti-PCR-produktkontaminationssystem används för PCR-reaktionen.

Systemet använder dUTP istället för dTTP.Efter PCR-reaktionen inkorporeras alla PCR-produkter (DNA-fragment) med dUTP;i nästa omgång av PCR-reaktionen inkuberas UNG-enzymet som tillsätts till systemet vid 37°C i 5 minuter före PCR, vilket kan vara specifikt. Bryt ned alla DNA-fragment som innehåller dUTP och utför sedan PCR-reaktion.Detta kan helt ta bort aerosolkontaminationen som orsakas av PCR-produkter.Effekten visas i bilden nedan:

Obs: För direkt PCR-serien kan du välja serieprodukterna från FJ Biotechs anti-PCR-produktföroreningssystem

Föreslå

För laboratorier som utför storskaliga genotypningstester, rekommenderas det starkt att använda UNG anti-PCR-produktkontaminationssystem för att testa reagenser förutom att bygga rimliga laboratorier.

Påminnelse: Användningen av detta system kan inte ta bort PCR-produktkontaminationen som redan har orsakats.Därför bör UNG-systemet användas i början av det relevanta testet, och UNG-systemet bör alltid användas för PCR-amplifiering för att förhindra kontaminering av PCR-produkter.Falskt positivt.

Det rekommenderas att använda Direct PCR-UNG-systemet från Forge Biotech när du utför storskaliga tester, såsom: Plant Leaf Direct PCR Kit-UNG；

Plant Seed Direct PCR Kit-UNG；

Animal Tissue Direct PCR Kit-UNG；

Mouse Tail Direct PCR Kit-UNG；

Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG.

Denna serie av kit från Foregene kan inte bara utföra PCR-detektion snabbt och i stor skala, utan också effektivt förhindra och kontrollera PCR-produktkontamination.