Introduktion:
RNA, vetenskapligt namn ribonukleinsyra, dess förkortning kommer från RiboNukleinsyra, är en typ av nukleinsyra som bildas genom att sammankoppla minst dussintals ribonukleotider genom fosfodiesterbindningar.
Utgångspunkten för att utforska RNA är att extrahera föroreningsfritt totalt RNA, och den grundläggande principen för RNA-extraktion kan grovt sammanfattas enligt följande:
1. Stör först cellerna
2. Ta sedan bort makromolekylära föroreningar (proteiner, lipider, DNA, etc.)
3. Slutligen fälls RNA ut samtidigt som salter och organiska lösningsmedel avlägsnas och RNA:t renas ytterligare
Tidigare och nutid av extraktionsmetod
Den första generationens RNA-extraktionsmetod är TRIzol-utfällningsmetoden (reagenser som används inkluderar guanidinisotiocyanat, fenol, kloroform, etc.) uppfann av en farfar vid namn Piotr Chomczynski och mormor Nicoletta Sacchi, eftersom denna uppfinning tillåter RNA-extraktion Snabbt och enkelt, sedan dess startade RNA-forskningen.
Senare sålde farfar detta patent till Invitrogen, och Invitrogen marknadsförde denna metod till världen och blev en mycket använd metod.
Senare förvärvades Invitrogen av Thermo!
Representativ produkt: Invitrogens TRIzol-reagens
TRIzol-utfällningsmetoden kräver dock multipel utfällning och extraktion av RNA, och de använda reagensen är toxiska och tar lång tid att fungera.
Därför kom den andra generationens kolonnenzymreningsmetod till, med användning av silikagelmembran som ett specifikt nukleinsyraadsorptionsmaterial för att maximera återvinningen av RNA i provet samtidigt som andra föroreningar avlägsnas.
Den andra generationens metod förenklar operationen på grundval av stabil prestanda, minskar riskfaktorn och förbättrar effektiviteten av RNA-extraktion.
Representativa produkter: QIAGEN RNeasy och de flesta inhemska produkter
Emellertid kräver både den första och andra generationens metoder användning av DNas för att avlägsna DNA-kontamination, vilket medför viss olägenhet för efterföljande nedströmsexperiment.Kvarvarande DNas kommer att minska effektiviteten av omvänd transkription och minska den första strängens cDNA-syntes, vilket påverkar noggrannheten av resultaten.
Därför är den tredje generationens extraktionsmetod optimerad på basis av den andra generationen.Experimentet behöver inte lägga till några enzymer, och RNA kan enkelt erhållas med endast två kolumner.
Kolumn 1: DNA-rengöringskolumn för att rensa DNA
Kolumn 2: Kolumn endast för RNA adsorberar och återvinner specifikt RNA
En sådan enkel operation sparar inte bara tid, utan underlättar också driften av nedströmsexperiment!
Representativa produkter: QIAGEN RNeasy Plus ochFöregeneRNA-rening produkter
(RNeasy Plus)
(ForegenesPlant Total RNA Isolation Kit)
Berätta tyst!Foregenes RNA-kit presenterar också en super lättanvänd RNase Eraser, som helt kan ta bort 400μg RNase på den fasta ytan på 1 minut, utan att tillföra några giftiga ämnen till människokroppen!
Bild1: Jämförelsediagram för operationella processer
Foregenes produkter kan slutföra RNA-extraktion på bara två låtar, gör inte andra avundsjuka på dina experimentframsteg!
Bild2:Eexperimentella resultat jämförelsediagram
Den första generationen (1: TRIzol)
Den andra generationen (2: RNeasy of QIAGEN)
Den tredje generationen (3: QIAGENs RNeasy plus, 4: Foregene)
Bild3: qPCR-graf (graf för förstärkningskurva)
Den första generationen (grön betyder TRIzol -, röd betyder TRIzol +)
Den andra generationen (himmelblå betyder QIAGEN RNeasy-, röd betyder QIAGEN RNeasy +)
Den tredje generationen (blå betyder QIAGEN RNeasy plus, grön betyder Foregene)
(Obs: qPCR-diagram "-" indikerar att DNas inte har tillsatts och DNA-kontamination inte har tagits bort. Därför är CT högre och resultatet inte korrekt; "+" indikerar att DNas har tillsatts och DNA-kontaminationen har tagits bort, resultatet är korrekt)
Varje teknisk uppgradering innebär att driften av experimentet utvecklas i en enklare och mer användarvänlig riktning.
Foregene syftar till att hjälpa fler vetenskapliga forskare att spara experimentell tid och kostnader, få experimentella resultat av hög kvalitet och gemensamt skapa mer värdefulla vetenskapliga forskningsresultat.
Posttid: 2021-09-09