Viral RNA-isoleringskit för viral RNA-rening från plasma, serum och andra prover
Kit Beskrivning:
Kat.nr. RE-02011/02014
För rening av viralt RNA från plasma, serum, cellfria kroppsvätskor, cellkultursupernatanter.
Isolera och rena snabbt viralt RNA från prover som plasma, serum, cellfria kroppsvätskor och cellkultursupernatanter.
-Du behöver inte oroa dig för RNA-nedbrytning.Hela kitet är RNase-fritt
-Enkelt—alla operationer slutförs vid rumstemperatur
-Snabb—drift kan slutföras på 20 minuter
-Högt RNA-utbyte: Kolumn endast för RNA och unik formel kan effektivt rena RNA
-Säker – inget organiskt reagens används
-Stor provbearbetningskapacitet — upp till 200 μl prover kan bearbetas varje gång.
-Hög kvalitet – det renade RNA:t är mycket rent, fritt från protein och andra föroreningar och kan möta olika nedströms experimentella tillämpningar.
Beskrivningar
Satsen använder spin-kolonnen och formeln utvecklad av Foregene, som effektivt kan extrahera viralt RNA av hög renhet och hög kvalitet från prover som plasma, serum, cellfri kroppsvätska och cellkultursupernatant.Satsen lägger specifikt till Linjär Akrylamid, som enkelt kan fånga upp små mängder RNA från proverna.RNA-Only Column kan effektivt binda RNA.Satsen kan behandla ett stort antal prover samtidigt.
Hela kitet innehåller inte RNas, så det renade RNA:t kommer inte att brytas ned.Buffert viRW1 och Buffer viRW2 kan säkerställa att den erhållna virala nukleinsyran är fri från protein, nukleas eller andra föroreningar, som kan användas direkt för nedströms molekylärbiologiska experiment.
Specifikationer
50 förberedelser, 200 förberedelser
Kitkomponenter
| Linjär akrylamid |
| Buffert viRL |
| Buffert viRW1, Buffert viRW2 |
| RNase-fri ddH2O |
| RNA-Endast kolumn |
| Instruktioner |
Egenskaper & fördelar
-Du behöver inte oroa dig för RNA-nedbrytning.Hela kitet är RNase-fritt
-Enkelt—alla operationer slutförs vid rumstemperatur
-Snabb—drift kan slutföras på 20 minuter
-Högt RNA-utbyte: Kolumn endast för RNA och unik formel kan effektivt rena RNA
-Säker – inget organiskt reagens används
-Stor provbearbetningskapacitet — upp till 200 μl prover kan bearbetas varje gång.
-Hög kvalitet – det renade RNA:t är mycket rent, fritt från protein och andra föroreningar och kan möta olika nedströms experimentella tillämpningar.
Satsparametrar
Kitapplikation:
Den är lämplig för extraktion och rening av viralt RNA i prover som plasma, serum, cellfri kroppsvätska och cellkultursupernatant.
Arbetsflöde
Förvaringsförhållanden
- Satsen kan förvaras i 24 månader i rumstemperatur (15-25 ℃), eller 2-8 ℃ under längre tid.
-Linjär akrylamidlösning kan förvaras i rumstemperatur i 7 dagar.Efter att ha mottagit satsen, ta ut linjär akrylamidlösning och förvara den vid -20 ℃.
-Efter att ha tillsatt linjär akrylamid till buffert viRL kan den lagras vid 2-8 ℃ i upp till 48 timmar.Använd den nyberedda lösningen.
Guider för problemanalys
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。
Inget RNA kan extraheras eller så är utbytet av nukleinsyra lågt
Det finns vanligtvis många faktorer som påverkar återvinningseffektiviteten, såsom: provets RNA-innehåll, driftsmetod, elueringsvolym, etc.。
Analys av vanliga orsaker:
1.Isbad eller lågtemperatur (4 °C) centrifugering under drift.
Förslag: Drift i rumstemperatur (15-25 ° C), aldrig isbad och lågtemperaturcentrifug.
2. Felaktig provförvaring eller provförvaring för länge.
Förslag: Förvara prover vid -80 ° C eller frys in i flytande kväve och undvik upprepad frys-upptining;försök att använda nyligen insamlade prover för RNA-extraktion.
3.Otillräcklig provlys
Rekommendation: Se till att provet och arbetslösningen (Linear Acrylamid) har blandats noggrant och inkuberats i 10 minuter vid rumstemperatur (15-25 ° C)
4. Eluenten tillsattes felaktigt
Rekommendation: Se till att RNase-Free ddH2O tillsätts i mitten av membranet i reningskolonnen
5. Felaktig volym vattenfri etanol i buffert viRW2
Förslag: Vänligen följ instruktionerna, tillsätt rätt volym vattenfri etanol till Buffer viRW2 och blanda dem väl innan du använder kitet.
6. Felaktig provanvändning.
Förslag: 200 µl prov per 500 µl buffert viRL.Överdriven provvolym kommer att resultera i minskad RNA-extraktionshastighet.
7. Felaktig elueringsvolym eller ofullständig eluering.
Förslag: Eluentvolymen i reningskolonnen är 30-50μl;om elueringseffekten inte är tillfredsställande, rekommenderas att tillsätta förvärmd RNase-fri ddH2O och förläng tiden vid rumstemperatur, såsom 5-10 min
8.Reningskolonnen har etanolrester efter sköljning i buffert viRW2.
Förslag: Om etanol fortfarande finns kvar efter sköljning i buffert viRW2 och tomrörscentrifugering i 2 minuter, kan reningskolonnen lämnas i rumstemperatur i 5 minuter efter tomrörscentrifugering för att helt avlägsna återstående etanol.
Nedbrytningen av renade RNA-molekyler
Kvaliteten på det renade RNA:t är relaterat till faktorer som provlagring, RNas-kontamination och drift.
Analys av vanliga orsaker:
1.De insamlade proverna sparades inte i tid.
Förslag: Om provet inte används i tid efter insamling, vänligen förvara det vid -80 ℃ eller flytande kväve omedelbart.För extraktion av RNA-molekyler, försök att använda nyligen insamlade prover när det är möjligt.
2. Samlade prover frystes och tinades upprepade gånger.
Förslag: Undvik upprepad frysning och upptining (högst en gång) under provtagning och förvaring, annars kommer utbytet av nukleinsyra att minska.
3.RNase infördes i operationssalen eller så användes inga engångshandskar, masker etc..
Förslag: Experimentet med extraktion av RNA-molekyler utförs bäst i ett separat RNA-operationsrum, och experimentbordet rengörs före experimentet.Bär engångshandskar och -masker under experimentet för att undvika RNA-nedbrytning orsakad av RNase-introduktion.
4. Reagenset är kontaminerat av RNase under användning.
Förslag: Ersätt med nytt viralt RNA-isoleringskit för relaterade experiment.
5. RNase-kontaminationen av centrifugrören, pipettspetsarna, etc. Förslag: Se till att centrifugrören, pipettspetsarna och pipetterna alla är RNase-fria.
De renade RNA-molekylerna påverkade experiment nedströms
RNA-molekylerna som renas av reningskolonnen kommer att påverka nedströmsexperiment om det finns för mycket saltjoner eller proteiner, såsom: omvänd transkription, Northern Blot, etc.。
1. Det finns kvarvarande saltjoner i de eluerade RNA-molekylerna.
Rekommendation: Se till att rätt volym vattenfri etanol har tillsatts till Buffer viRW2 och tvätta reningskolonnen två gånger enligt rätt centrifugeringshastighet i bruksanvisningen. Om det fortfarande finns saltjoner kvar kan du tillsätta Buffer viRW2 till reningskolonnen och lämna den i rumstemperatur i 5 minuter.Utför sedan centrifugering för att ta bort föroreningar med saltjoner i största utsträckning
2. Det finns kvarvarande etanol i de eluerade RNA-molekylerna
Förslag: när du har bekräftat att reningskolonner har sköljts av Buffer viRW2, utför tomrörscentrifugering enligt centrifugalhastigheten i bruksanvisningen.Om det fortfarande finns etanol kvar kan den lämnas i rumstemperatur i 5 minuter efter en tomrörscentrifugering för att avlägsna resterande etanol i största utsträckning.
Instruktionsmanualer:
Instruktionsbok för viral RNA-isoleringskit
