Viral DNA&RNA Isolation Kit Viral DNA och RNA Extraction Rening Preparation Kit
Specifikationer
50 förberedelser, 200 förberedelser
Viral RNA Nucleic acid Purification Extraction Isolation Kit använder spin-kolonnen och formeln utvecklad av Foregene, som effektivt kan extrahera viralt RNA av hög renhet och hög kvalitet från prover som plasma, serum, cellfri kroppsvätska och cellkultursupernatant.Satsen lägger specifikt till Linjär Akrylamid, som enkelt kan fånga upp små mängder RNA från proverna.RNA-Only Column kan effektivt binda RNA.Satsen kan behandla ett stort antal prover samtidigt.
Hela kitet innehåller inte RNas, så det renade RNA:t kommer inte att brytas ned.Buffert viRW1 och Buffer viRW2 kan säkerställa att den erhållna virala nukleinsyran är fri från protein, nukleas eller andra föroreningar, som kan användas direkt för nedströms molekylärbiologiska experiment.
Kitkomponenter
| Linjär akrylamid |
| Buffert DRL |
| Buffert RW1, Buffert RW2 |
| RNase-fri ddH2O |
| DNA/RNA-kolumn |
| Instruktioner |
Egenskaper & fördelar
■ Drift i rumstemperatur (15-25℃) under hela processen, utan isbad och lågtemperaturcentrifugering.
■ Komplett kit RNase-Free, ingen anledning att oroa sig för RNA-nedbrytning.
■ Högt nukleinsyrautbyte: endast DNA/RNA Kolumn och unik formel kan effektivt rena DNA och RNA.
■ Stor provbearbetningskapacitet: upp till 200 μl prover kan bearbetas varje gång.
■ Snabb hastighet: lätt att använda och kan genomföras inom 20 minuter.
■ Säkerhet: inget organiskt reagens krävs.
■ Hög kvalitet: De renade RNA-fragmenten är av hög renhet, fria från protein och andra föroreningar och kan uppfylla olika experimentella tillämpningar i nedströmsriktningen.
Kitapplikation
Den är lämplig för extraktion och rening av viral nukleinsyra i prover som plasma, serum, cellfri kroppsvätska och cellkultursupernatant.
Arbetsflöde
Diagram
Lagring och hållbarhet
■ Detta kit kan förvaras i 24 månader under torra förhållanden vid rumstemperatur (15-25 ℃);om den behöver förvaras längre tid kan den lagras i 2–8℃.
■ Linjär akrylamidlösning kan förvaras i rumstemperatur i 7 dagar;efter att du tagit emot satsen, ta ut den och förvara den vid -20°C.
■ Efter tillsats av linjär akrylamid till buffert DRL kan den förvaras vid 2-8°C i upp till 48 timmar.Använd den färdiga lösningen.
Guide för problemanalys
Följande är en analys av de problem som kan uppstå vid extraktion av viralt DNA/RNA, i hopp om att vara till hjälp för dina experiment.Dessutom, för andra experimentella eller tekniska problem än driftsinstruktioner och problemanalys, har vi dedikerad teknisk support för att hjälpa dig.Om du har några behov, vänligen kontakta oss: 028-83360257 eller E-post:
Tech@foregene.com.
Ingen nukleinsyraextraktion eller lågt nukleinsyrautbyte
Det finns vanligtvis många faktorer som påverkar återvinningseffektiviteten, såsom: provets nukleinsyrainnehåll, operationsmetod, elueringsvolym, etc.
Analys av vanliga orsaker:
1. Ett isbad eller lågtemperatur (4°C) centrifugering utfördes under proceduren.
Förslag: Kör i rumstemperatur (15-25°C) under hela processen, isbad och lågtemperaturcentrifugering.
2. Provet lagrades felaktigt eller provet lagrades för länge.
Rekommendation: Förvara proverna vid -80°C och undvik upprepad frysning och upptining;försök att använda nyligen insamlade prover för nukleinsyraextraktion.
3. Otillräcklig provlysering.
Rekommendation: Se till att provet och lysarbetslösningen blandas noggrant och inkuberas i rumstemperatur (15-25°C) i 10 minuter.
4. Felaktig tillsats av elueringsmedel.
Förslag: Se till att RNase-Free ddH2O tillsätts droppvis i mitten av reningskolonnmembranet och släpp det inte på reningskolonnringen.
5. Den korrekta volymen absolut etanol tillsattes inte buffert RW2.
Förslag: Följ instruktionerna, tillsätt rätt volym absolut etanol till buffert RW2 och blanda väl innan du använder kitet.
6. Olämplig provvolym.
Förslag: 200 µl prov bearbetas för varje 500 µl buffert DRL.Överdriven provbearbetning kommer att resultera i lägre utbyte av nukleinsyraextraktion.
7. Olämplig elueringsvolym eller ofullständig eluering.
Rekommendation: Reningskolonnens elueringsvolym är 30-50 μl;om elueringseffekten inte är tillfredsställande, rekommenderas att förlänga tiden vid rumstemperatur efter tillsats av förvärmd RNase-Free ddH2O, såsom 5-10 min.
8. Etanol finns kvar på kolonnen efter tvättning med buffert RW2.
Förslag: Om etanol finns kvar efter centrifugering med buffert RW2 i 2 minuter, kan kolonnen placeras i rumstemperatur i 5 minuter efter centrifugering för att helt avlägsna resterande etanol.
Den renade nukleinsyran bryts ned
Kvaliteten på den renade nukleinsyran är relaterad till bevarandet av provet, RNas-kontamination, drift och andra faktorer.Analys av vanliga orsaker:
1. De insamlade proverna lagrades inte i tid.
Förslag: Om provet inte används i tid efter insamling, vänligen förvara det vid -80°C vid låg temperatur omedelbart.För RNA-extraktion, försök att använda nyligen insamlade prover.
2. Samla prover och frys in och tina upprepade gånger.
Förslag: Undvik frysning och upptining (inte mer än en gång) under insamling och lagring av prover, annars kommer nukleinsyrautbytet att minska.
3. RNase införs i operationsrummet eller engångshandskar, masker etc. bärs inte.
Rekommendation: RNA-extraktionsexperiment utförs bäst i ett separat RNA-operationsrum, och laboratoriebordet bör rengöras före experimentet.
Använd engångshandskar och -masker under experimentet för att undvika RNA-nedbrytning orsakad av införandet av RNase i största utsträckning.
4. Reagenset kontaminerats med RNas under användning.
Rekommendation: Ersätt med ett nytt viralt DNA/RNA-isoleringskit för relaterade experiment.
5. Centrifugerören och pipettspetsarna som används för RNA-manipulation är kontaminerade med RNas.
Förslag: Se till att de centrifugrör, pipettspetsar, pipetter, etc. som används för RNA-extraktion, alla är RNase-fria.
Renad nukleinsyra påverkar experiment nedströms
DNA och RNA renat av reningskolonnen, om saltjon- och proteinhalten är för hög kommer det att påverka nedströmsexperimenten, såsom: PCR-amplifiering, omvänd transkription, etc.
1. Det eluerade DNA:t och RNA:t har kvarvarande saltjoner.
Förslag: Se till att rätt volym absolut etanol tillsätts buffert RW2 och tvätta reningskolonnen två gånger med den centrifugeringshastighet som anges i bruksanvisningen;Utför centrifugering för att minimera saltjonkontamination.
2. Det eluerade DNA:t och RNA:t har etanolrester.
Förslag: Efter att ha bekräftat tvättningen med Buffer RW2, utför tomrörscentrifugering med centrifugeringshastigheten i bruksanvisningen;om det fortfarande finns etanolrester kan du centrifugera det tomma röret och sedan placera det i rumstemperatur i 5 minuter för att ta bort etanolresterna i största möjliga utsträckning.
Instruktionsmanualer:
Instruktionsmanual för viralt DNA&RNA-isoleringskit
