• Facebook
  • linkedin
  • Youtube

Laboratorietestning börjar med provtagning, och provinsamling är det enklaste att förbise.Det viktigaste för provtagningen är att välja rätt provtyp, använda lämpliga provtagningsverktyg och genomföra rimlig transport och bearbetning.

I. Provtyp

Vanliga exempeltyper är följande:

dsafgsd

Provtagningsmetoden kan hänvisa till de tekniska specifikationerna för miljöövervakning av det nya coronaviruset på marknaden för jordbrukshandel (basar)”:

1. Svabba prover från svalgpinnar, händer, kläder och andra föremål från utövare: det är nödvändigt att använda viruskonserveringslösningen i virusprovtagningsröret och helt infiltrera bomullspinnarna.Markytan) appliceras upprepade gånger och sköljs mer än 3 gånger.Samtidigt är det nödvändigt att utföra flerpunktsfördelad provtagning på ytan av det samplade objektet.

2. Matytprover: Livsmedelsprover kan inte tas direkt.Maten som ska samlas in ska separeras noggrant och förvaras i en ren provtagningspåse innan proverna tas.Det är nödvändigt att använda viruskonserveringslösningen i virusprovtagningsröret, efter att provtagningspinnen har blötlagts helt, för att upprepade gånger smeta och skölja ytan på matprovet som ska tas mer än 3 gånger.Samtidigt är det nödvändigt att utföra flerpunktsfördelad provtagning på provytan.

3. Avloppsprover: Beroende på fördelningen av avloppssystemet på marknaden, välj 2-3 avloppsprovtagningsplatser, med fokus på den interna ledningsnätuppsamlingen, nedströms vattenflödesriktningen eller kopplingen till det kommunala ledningsnätet.För att ta ett pinnprov, doppa ner det i avloppsvattnet med en bomullspinne för att få det att absorbera avloppsvattnet och skölj det i provtagningsröret mer än 3 gånger.För att samla avloppsprover, använd polyetenplastflaskor för att samla in 30-500 ml avloppsvattenprover;för uppsamling av avloppsvatten med en volym större än 500 mL, kan polyetenplasthinkar eller speciell anrikningsutrustning för vattenprov på plats användas.Samtidigt är det nödvändigt att genomföra flerpunktsfördelad provtagning för avloppsprovtagningsplatsen.

4. Djurprover: För levande djur kan provtagningspinnar användas för att samla in kroppsytans pinnar, orofaryngeala pinnprover och analprover, och exkrementer eller sekretprover kan också samlas in och registreras i enlighet med detta på registerbladet.För djurprover som har genomgått avhudning, etc., använd bomullspinnar för att samla in proverna från deras kroppsyta och kroppshålrum.Det är nödvändigt att använda viruskonserveringslösningen i virusprovtagningsröret för att helt infiltrera provtagningsbomullspinnen, och sedan upprepa appliceringen av ytan på matprovet som ska tas.Shabu mer än 3 gånger.Samtidigt är det nödvändigt att utföra flerpunktsfördelad provtagning på provytan.

5. Övriga apparater: behållare för transport och uppfödning av djur såsom burar eller fisktankar.Först, observera eller förstå de specifika typerna av djur som lagras och föds upp i behållaren, och samla pinnprover på behållarens innervägg eller flytande prover av innehållet.

6. Samla aerosolprover i områden där människor samlas, dåligt ventilerade lokala handelsområden, kontor och vilorum.

II.Samplingsverktyg
1. Bloduppsamlingsrör
Om du behöver göra nukleinsyratestning och antikoagulantiaprover senare, rekommenderas att du använder ett vakuumblodkärl som innehåller EDTA-antikoagulant för att samla blod;för serumprover rekommenderas att använda ett vakuumblodkärl utan antikoagulantia.

fdsgfd

2. Provtagningspinnen

Det rekommenderas att använda bomullspinnar av polypropen istället för svabbar av kalciumalginat eller pinnar med trästolpar, eftersom de kan innehålla ämnen som inaktiverar vissa virus och hämmar PCR-tester.Svabbar med bomullshuvud kan inte användas, eftersom bomullsfibrer har en stark adsorption av protein och inte lätt elueras i den efterföljande konserveringslösningen.

I "Tekniska specifikationer för 10-i-1 blandad insamling och detektering av nya Coronavirus-nukleinsyror" anges tydligt att "provtagningspinnen ska vara gjord av polyester, nylon och andra icke-bomulls- och icke-kalciumalginatmaterial, och handtaget ska vara tillverkat av icke-trämaterial.Brottpunkten är cirka 3 cm från toppen av pinnhuvudet, vilket är lätt att bryta.”

CDC i USA nämnde också "Använd endast syntetiska fiberservetter med plast- eller trådskaft.Använd inte dubbar av kalciumalginat eller dubbar med träskaft,eftersom de kan innehålla ämnen som inaktiverar vissa virus och hämmar PCR-testning.

För närvarande används ofta en steril flockningspinne av nylon för engångsbruk kombinerad med en plaststav.Den flockade pinnen har bättre vattenabsorption och frigöringshastighet.Enligt olika provtagningsställen har pinnhuvudet också olika storlekar och fibrer.Tjockheten.”

fsdg

3. Prov transportkonserveringslösning

Virusinaktiveringskonserveringslösning: en lämplig mängd guanidinsaltkoncentration och en mängd olika viruslyskomponenter kan lysera viruset direkt för att frigöra nukleinsyra, inaktivera RNas och DNas och säkerställa integriteten hos nukleinsyra, som kan användas för efterföljande qPCR-detektion.Det kan inte användas för virusodling och isolering.

Virustransport- och konserveringslösning: innehåller salter, aminosyror, vitaminer, glukos och protein som behövs för virusets överlevnad, vilket kan upprätthålla virusets aktivitet.Det kan användas för nukleinsyraextraktion och detektering av viruset i framtiden, och det kan också användas för odling och separation av viruset.

4. Provkonserveringsrör och provpåse

Provförvaringsröret ska vara ett sterilt plaströr med skruvlock som inte adsorberar nukleinsyra.Varje provrör bör täckas med en provpåse för att förhindra läckage och kontaminering av provet.

fdsdf

III.Störande ämnen i provet

Störande ämnen i PCR-experiment

1. endogen interferent

Ämnen som finns i kroppsprovet kan störa upptäckten av andra ämnen.

Blod:hem (>1mg/ml), hemin (>0,1ng/μl), triglycerider, IgG, etc.;

Urin:Urea (20 mM);

Pall:växtpolysackarider, cholat;

Vävnad:proteas, kollagen;

Mjölkproteas, kalciumjon;

Läkemedel: antibiotika, antivirala läkemedel, hormoner, etc.

Övrig.

2. exogen interferent

Det kommer från ämnen som kan störa upptäckten av andra ämnen in vitro.Provtillsatser och ämnen som kan kontaktas under provtagning och bearbetning:

Testa förnödenheter: serumseparationsgel, provtagningsbehållare och gummipropp, kateter, kateterspolvätska, handskpulver, etc.

Antikoagulant: heparin (>0,1 U/ml), EDTA (>0,5 mM), etc.;

Organiska lösningsmedel: isopropanol (>0,1 IU/ml), betain, dimetylsulfoxid, formamid, glycerin, PEG, etc.;

Desinfektionsmedel: alkoholer (etanol>1%), aldehyder, fenoler (fenol>0,2%), peroxider, starka syror (HCL), starka alkalier (NaOH), etc.;

Rengöringsmedel:SDS (>0,005%);

Jord: Humus

Färgämne: Indigo

Övrig.

Under faktiska provtagningsförhållanden utomhus, såsom insamling av miljöprover, kan proverna innehålla en mängd olika störande ämnen, och sammansättningen av störande ämnen på varje plats är olika, vilket kräver att PCR-interferensexperiment utförs enligt lokala förhållanden.

IV.Provlagrings- och transportförhållanden

Färska insamlade kliniska prover ska skickas till laboratoriet inom 2 till 4 timmar efter insamling vid 2°C till 8°C.Förvara vid 4 ℃ inom 24 timmar.Prover som används för virusisolering och nukleinsyradetektion bör testas så snart som möjligt.Prover som kan testas inom 24 timmar kan förvaras vid 4°C;Prover som inte kan detekteras inom 24 timmar bör förvaras vid -70°C eller lägre (om inte - Förvaras vid 70°C i kylskåp vid -20°C).

Sammanfattning:Standardiserad insamling, transport och lagring av prover är avgörande för efterföljande testning.De falska negativa resultaten från många laboratorietester orsakas av felaktig insamling, transport och lagring av prover som leder till nedbrytning av viral nukleinsyra.Men många laboratorier ignorerar fortfarande vikten av provtagning.Jag hoppas att den här artikeln kan väcka allas uppmärksamhet på provtagning och göra mer vetenskapliga och rimliga provtagningar!

Relaterad produkt:

SARS-CoV-2 Variant Nucleic Acid Detection Kit (I) (Multiplex PCR Fluorescent Probe Method) - För detektion av mutanter från Brasilien, Sydafrika och Storbritannien


Posttid: 17 september 2021