• Facebook
  • linkedin
  • Youtube

1: Byt ut de experimentella förråden i tid

news812 (1) 

Ställ in (NTC) negativ kontroll och upprepa det många gånger.När det upptäcks att det finns kontaminering av PCR-produkter i laboratoriet, byt ut alla experimentella förråd i tid.Såsom: späd om och förbered primrarna, omsterilisera pipettspetsen, EP-röret, ddH2O, etc., ersätt med en ny pipett och tillfälligt låna andra laboratorier för att utföra PCR-experiment.Det kontaminerade laboratoriet ska ventileras och bestrålas med ultravioletta strålar tills kontamineringen av PCR-produkten är eliminerad innan experimentet fortsätter.

2: Förläng UV-exponeringstiden

news812 (2)

Det är värt att notera att för att ta bort DNA-kontamination bör vanlig ultraviolett strålning förlängas med 2 timmar än vanligt.Trots det är effekten av UV-bestrålning på att ta bort små fragment (under 200 bp) av DNA-kontamination fortfarande inte bra.

Ultraviolett våglängd (nm) är i allmänhet 254/300 nm, och det räcker för att bestråla i 30 minuter.Det bör noteras att när man väljer UV för att eliminera kontamineringen av kvarvarande PCR-produkter bör längden på PCR-produkten och fördelningen av baser i produktsekvensen beaktas.UV-bestrålning är endast effektiv för långa fragment över 500 bp och har liten effekt på korta fragment.

Under UV-bestrålning kommer pyrimidinbaserna i PCR-produkten att bilda dimerer.Dessa dimerer kan avsluta förlängningen, men inte alla pyrimidiner i DNA-kedjan kan bilda dimerer, och UV-bestrålning kan också bryta dimererna..Graden av dimerbildning beror på UV-våglängden, typen av pyrimidindimer och sekvensen av nukleotider intill dimerstället.Därför, om de PCR-amplifierade fragmenten är små, rekommenderas det att använda UNG anti-PCR-produktkontaminationssystem.

3: Vanligt använda DNA-föroreningsrenare

news812 (3)

Aerosoler genereras lätt när pipetter tillsätts, vilket är svårt att undvika, och det sätter sig snabbt.Därför är det utan tvekan ett bra val att ofta använda speciella DNA-föroreningsrenare för att förhindra spridning av DNA-föroreningar.

4: Använd UNG anti-föroreningssystem

news812 (4)

Efter att PCR-produktkontaminationen har tagits bort kan testlaboratoriet använda UNG anti-PCR-produktkontaminationssystem för att förhindra PCR-produktkontamination.I allmänna laboratorier kan du utföra enkla experimentella partitioner, strikt separera PCR-produktområdet från andra områden, upprätta vissa laboratorieregler och -föreskrifter och genomföra relevant utbildning för att förhindra uppkomsten av PCR-produktkontamination.

Rekommendationer: Att etablera ett rimligt PCR-laboratorium, upprätthålla en bra PCR-miljö, utarbeta standard-PCR-driftsprocedurer och odla den rigorösa driftmedvetenheten hos experimenterande är nycklarna till att förhindra eller minska föroreningen av PCR-experiment.


Posttid: 2021-aug-12