Födelsen av PCR
PCR (Polymerase Chain Reaction)
Det har gått mer än 30 år sedan uppfinningen av polymeraskedjereaktion.I mer än 30 år, efter att många forskare runt om i världen fortsätter att komplettera och förbättra, har PCR-teknologin blivit den mest använda och mest använda och viktigaste grundläggande forskningsmetoden inom hela Life Science-området.
TouchDown PCR, Real-Time PCR, Multi PCR, etc. som utvecklats på grundval av den breda tillämpningen av traditionell PCR-teknik, såväl som den nyligen framkomna Digital PCR (digital PCR), har avsevärt berikat forskningsmetoderna för majoriteten av vetenskapliga forskare och avsevärt påskyndat utvecklingsprocessen för moderna biovetenskaper, särskilt molekylärbiologin, har gjort ett stort bidrag till mänsklighetens liv och natur.
Defekter i traditionell PCR-teknik
Komplex nukleinsyraseparation ochextraktion:
★ Traditionell PCR-teknik: krävs
★ PCR-härledd teknologi: krävs
★ DNA- och RNA-prover: stora skillnader, svåra driftkrav
★ Kroppsrisker: giftiga reagenser skadar kroppen
Traditionell PCR-teknologi och derivatteknologi har en förutsättning för nukleinsyraseparation och rening
Varje biologiskt prov måste genomgå en serie komplicerad och tråkig provbehandling för att få nukleinsyraprover som uppfyller kraven för PCR-teknik.
Separation och extraktion av DNA och RNA har alltid varit en grundläggande uppgift som relevanta vetenskapliga forskare behöver upprepa varje dag.
På grund av de enorma skillnaderna mellan prover är separations- och extraktionsprocesserna av DNA och RNA också mycket olika.Detta arbete kräver en hög teknisk kompetens för operatörerna.Traditionella separations- och extraktionstekniker kräver långvarig kontakt med vissa mycket giftiga kemiska reagenser.Det kommer att orsaka oåterkalleliga skador på operatörens kropp och till och med orsaka direkta skador under experimentet.
Samtidigt är separation och extraktion av nukleinsyror en arbetsintensiv uppgift för dem som har ett stort antal prover att studera.
Nukleinsyraisolerings- och extraktionssatser på marknaden är nu mogna och det finns många märken, men de är ungefär likadana.Oavsett om det är ett centrifugalkit med kiselgelmembrankolonn eller ett kit med magnetiska pärlor, tar det mycket tid och är dyrt.Utöver kostnaden för satsen finns det också särskilda krav på laboratorieutrustning.Den automatiserade arbetsstationen som används i den magnetiska pärlmetoden är en mycket typisk storskalig högvärdig utrustning, vilket är en enorm kostnad för laboratoriet.
Sammanfattningsvis
Innan man utför PCR-experiment är förbehandling av prover en oundviklig och alltid huvudvärk för forskare.Hur man löser detta problem och om PCR-experiment kan utföras utan separation och extraktion av nukleinsyror har alltid varit tanken hos majoriteten av vetenskapliga forskare och klinisk laboratoriepersonal.
Foregenes lösning
Efter år av mödosam forskning om Direct PCR-teknologi och relaterade kit, bröt Forgene framgångsrikt igenom många flaskhalsar och uppnådde framgångsrikt direkt PCR för många typer av olika prover med stark resistens och anpassningsförmåga, vilket gör det möjligt för forskare att bli av med besvärlig och farlig separation och extraktion av nukleinsyror.Detta kommer att avsevärt minska allas arbetsintensitet, påskynda experimentprocessen och spara kostnader för vetenskaplig forskning och testning.
Forgenes förståelse och kunskap om DirectPCR
För det första är DirectPCR-teknologi en direkt PCR-teknik för olika biologiska provvävnader.Under detta tekniska tillstånd finns det inget behov av att separera och extrahera nukleinsyror, och vävnadsprovet används direkt som objekt, och målgenprimrarna läggs till för PCR-reaktion.
För det andra är DirectPCR-teknologin inte bara en traditionell DNA-mallamplifieringsteknologi, utan inkluderar även RNA-mall omvänd transkriptions-PCR.
För det tredje utför DirectPCR-teknologin inte bara direkt rutinmässiga kvalitativa PCR-reaktioner på vävnadsprover, utan inkluderar även realtids-qPCR-reaktioner, vilket kräver att reaktionssystemet har en stark förmåga att motstå bakgrundsfluorescensinterferens och att motverka endogena fluorescensdämpare.
För det fjärde kräver de vävnadsprover som riktas till DirectPCR-teknologin endast frisättning av nukleinsyramallar och tar inte bort proteiner, polysackarider, saltjoner etc. som stör PCR-reaktionen.Detta kräver att nukleinsyrapolymeraset och PCR-blandningen i reaktionssystemet har utmärkt antireversibilitet och anpassningsförmåga, och kan säkerställa enzymaktivitet och replikationsnoggrannhet under komplexa förhållanden.
För det femte har vävnadsproverna som riktats till DirectPCR-teknologin inte utsatts för någon nukleinsyraanrikningsbehandling, och mallkvantiteten är mycket liten, vilket kräver extremt hög känslighet och amplifieringseffektivitet hos reaktionssystemet.
Slutsats
DirectPCR-teknologin är en av de viktigaste tekniska utvecklingarna och innovationerna under de senaste 30 åren sedan PCR-teknikens födelse.Forgene har och kommer att fortsätta att vara en pionjär och innovatör av denna teknik.
Tillämpningsmöjligheterna för DirectPCR-teknik är mycket breda.Den ständiga förbättringen och främjandet av denna teknik kommer säkerligen att medföra omstörtande förändringar i vetenskaplig forskning och inspektionsarbete.Detta är en PCR-teknikrevolution.
Posttid: 21-2-2017
