W:Bror, den omvända transkriptionen är klar, och slutligen det sista steget – fluorescerande kvantitativ PCR!Hej, bror, vad är kvantitativ PCR i realtid?
M:PCR vet du alltid, eller hur?
W: Du vet, PCR är polymeraskedjereaktionen, och det är en teknik som ökar DNA!
M:Det är nästan... Det är en teknisk metod att amplifiera målsekvensen till mer än en miljon gånger genom specifika primrar, men detta indikerar bara närvaron eller frånvaron av målsekvensen och kan inte bestämma mängden av den initiala mallen.Fluorescens kvantitativ PCR är en teknisk metod utvecklad för att lösa detta problem.Realtids-PCR och kvantitets-PCR (qPCR) refererar i allmänhet till det.
W: Skillnaden från vanlig PCR ligger i fluorescenskvantifiering?
M: Ja, det vill säga i förlängningssteget av varje PCR-cykel detekteras fluorescenssignalintensiteten, och den initiala mallmängden kan beräknas enligt förändringen av signalintensiteten.
W: Det känns så komplicerat!Måste jag räkna ut detta själv?
M: Detta kräver att du lär dig långsamt, det är bäst att kunna förstå principen.Nu kan du fokusera på CT-värdet först, vilket är relativt intuitiva experimentella data, och dess storlek motsvarar storleken på den initiala mallmängden.Det finns även grafer som amplifieringskurvor och smältkurvor.De har sista ordet om ditt experiment är framgångsrikt eller inte.
W: Åh, bror.Då ska jag göra qPCR-experimentet!
M: Var särskilt uppmärksam på att inte lägga till mallar i reagensområdet, annars kommer din oanvända blandning lätt att förorenas!
W: Jag förstår!

Real Time PCR Easyᵀᴹ-SYBR Green I Kit

Högre effektivitet, större specificitet
Hög känslighet, bra kompatibilitet